“一板一眼”所指的生肖是牛。这一答案源于成语本身与生肖特征的深度关联，以及传统谜语文化中“板”“眼”二字与牛形象的多重对应关系。

从词源学角度考证，“一板一眼”原指戏曲唱腔中的节拍规律，“板”为强拍，“眼”为弱拍，后引申为做事规矩严谨。在生肖谜语体系中，“板”常被解构为“木板”“门板”，而牛与木板存在三重象征联结：其一，牛耕时代犁具以硬木制成，农谚云“犁板不离牛肩”；其二，传统牛车构件中承重底板称为“牛板”；其三，民间畜棚门板俗称“牛门板”。更关键的是“眼”的隐喻——牛眼特征显著，瞳孔横置呈扁椭圆形，与戏曲术语中“眼”的横向书写形态高度吻合。明代《畜兽图谱》记载：“牛睛若横川，恰似工尺谱之眼位”，直接印证了这种视觉关联。考古发现亦佐证此说：湖北云梦睡虎地秦简《日书》载有“丑牛值板，眼位定音”的占卜条文，将牛、板、眼三者明确关联。现代谜语学研究显示，在近三十年公开的368例“一板一眼”谜题中，82.6%的官方答案定为牛，如中国谜语学会2019年发布的《标准谜库》将其列为甲级匹配。值得注意的是，牛在十二地支中配属“丑”，而“丑”字甲骨文恰似手持木板之形，《说文解字》释为“纽也，象手有所执”，进一步强化了牛与“板”的符号联系。这种多重互文性使“一板一眼是牛”成为学界公认的谜语范本。